来源:今日热点 | 2023-02-17 11:17:30 |
质粒转化是指将外源质粒导入原核细胞的过程。其中的转化是指将外源的脱氧核糖核酸分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种手段。将质粒脱氧核糖核酸导入细菌的过程称为转化。此感受态细菌细胞在氯化钙低渗溶液中膨胀为球状。质粒脱氧核糖核酸与氯化钙形成抗磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经42摄氏度短时间的热冲击处理,促进细胞吸收脱氧核糖核酸复合物。在丰富培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中,外源基因得到表达。在选择性培养平板上,可选出所需的转化子。
质粒小量提取跟大量提取有什么区别?
1、所需菌液不同。大提用于大量菌液的提取,100ml-500ml 均可,而小提用的菌液量很少,一般1.5-5ml。
2、纯度不同。一般试剂盒中大提比小提多了溶菌酶、异丙醇(回收沉淀核酸)、含一定量PEG的氯化物(回收质粒DNA)及乙酸铵等,其作用及目的都是有利于细菌的裂解和质粒的纯化,所以大提的产物比小提的量多很多,而且纯度很高。
3、实验要求不同。小提一般用于质粒鉴定和对纯度要求不是很高的实验,大提用于质粒的大量提取和转染等纯度要求很高的实验。
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